联系我们
联系人: 021-59541103 021-60443211
电话:021-59541103 021-60443211
手机:13585831301
E-mail:3004967995@qq.com
详细地址: 上海嘉定区嘉罗公路1661
技术服务
NADP磷酸酶(NADPase)测试盒操作步骤
阅读:1632 发布时间:2021/11/24 15:41:08
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。000~2000g 离心 min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
MCF-7(MCF7)(ATCC来源), 人乳腺癌细胞
MDA-MB-231(ATCC来源), 人乳腺癌细胞
Raji,人Burkitt's淋巴瘤细胞
Saos-2,人成骨肉瘤细胞
Caco-2,人结直肠腺癌细胞
NCI-N87 [N87]人胃癌细胞
MGC80-3(MGC-803)人胃癌细胞
EC109,人食管癌细胞
HGC-27人胃癌细胞
AGS人胃腺癌细胞
THP-1人单核白血病细胞
HuH-7人肝癌细胞
RBE, 人肝胆管癌细胞
MiaPaCa-2, 人胰腺癌细胞
KM3, 人多发性骨髓瘤细胞
QGY-7701, 人肝癌细胞
PANC-1, 人胰腺癌细胞
U266B1 [U266], 人多发性骨髓瘤细胞
Hep G2, 人肝癌细胞系
PC-12(高分化),PC12,大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞株(高分化)
GH3, 大鼠垂体生长激素腺瘤
Hepa 1-6, 小鼠肝癌细胞
QBC-939, 人胆管癌细胞
B16-F10, 小鼠黑色素瘤高转移细胞
SGC-7901, 人胃腺癌细胞系
SK-N-SH, 人神经母细胞瘤细胞
原创作者:上海莼试生物技术有限公司