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唾液乳酸杆菌PCR检测试剂盒试剂准备步骤

阅读:507     发布时间:2021/3/17 14:46:01

唾液乳酸杆菌PCR检测试剂盒试剂准备步骤:
 
1. DNA模板
 
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
 
3.10×PCR Buffer
 
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
 
5.Taq酶操作步骤 
 
1.唾液乳酸杆菌PCR检测试剂盒在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
 
      10×PCR buffer             5μl
 
      dNTP mixl                 4μl
 
       引物1(10pM)               2μl
 
       引物2(10PM)              2μl
 
       Taq酶(2U/μl)            1μl
 
      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
 
      加ddH2O至               50 μl
 
    视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
 
2.唾液乳酸杆菌PCR检测试剂盒调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
 
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
 
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
Bartonella elizabethae伊丽莎白巴尔通体LAMP试剂盒
Bartonella henselae汉氏巴尔通体(汉塞巴尔通体、猫抓病、猫抓热)LAMP试剂盒
Bartonella quintana五日热巴尔通体LAMP试剂盒
Bartonella spp.巴尔通体通用LAMP试剂盒
Bartonella vinsonii文氏巴尔通体LAMP试剂盒
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Bear Canyon virus(BCNV)熊峡谷病毒RT-LAMP试剂盒
Beauveria bassiana球孢白僵菌LAMP试剂盒
Bebaru Virus(BEBV)贝巴鲁病毒RT-LAMP试剂盒
Besnoitia besnoiti贝氏贝诺孢子虫LAMP试剂盒
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Bifidobacterium spp.双歧杆菌属通用LAMP试剂盒
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Blastomyces dermatitidis皮炎芽生菌LAMP试剂盒
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Bluetongue Virus(BTV)蓝舌病病毒8型RT-LAMP试剂盒
 

原创作者:上海莼试生物技术有限公司

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