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饶氏无绿藻PCR检测试剂盒反应五要素

阅读:391     发布时间:2021/4/13 14:55:56

饶氏无绿藻PCR检测试剂盒反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
Apple Chlorotic Leafspot Virus(ACLSV)苹果褪绿叶斑病毒RT-PCR试剂盒
Apple Fruit Crinkle Viroid(AFCVd)苹果皱果类病毒RT-PCR试剂盒
Apple Mosaic Virus(ApMV)苹果花叶病毒RT-PCR试剂盒
Apple proliferation phytoplasma苹果串生植原体PCR试剂盒
Apple Stem Grooving Virus(ASGV)苹果茎沟病毒RT-PCR试剂盒
Apricot chlorotic leafroll phtoplasma杏褪绿卷叶植原体PCR试剂盒
Arabis Mosaic Virus(ArMV)南芥菜花叶病毒RT-PCR试剂盒
Ash yellows phytoplasma白蜡树黄化植原体PCR试剂盒
Aster yellows phytoplasma翠菊黄化病植原体PCR试剂盒
Atropellis pinicola松生枝干溃疡病菌PCR试剂盒
Atropellis piniphila嗜松枝干溃疡病菌PCR试剂盒
Avocado Sunblotch Viroid(ASBVd)鳄梨日斑类病毒RT-PCR试剂盒
Banana Bract Mosaic Virus(BBrMV)香蕉苞片花叶病毒RT-PCR试剂盒
Barley Mild Mosaic Virus(BaMMV)大麦轻度花叶病毒RT-PCR试剂盒
Barley Stripe Mosaic Virus(BSMV)大麦条纹花叶病毒RT-PCR试剂盒
Barley Yellow Dwarf Virus(BYDV)大麦黄矮病毒RT-PCR试剂盒
Barley Yellow Mosaic Virus(BaYMV)大麦黄花叶病毒RT-PCR试剂盒
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Bean Yellow Mosaic Virus(BYMV)菜豆黄斑花叶病毒PCR试剂盒
 

原创作者:上海莼试生物技术有限公司

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