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小鼠骨髓瘤细胞；P3/NSI/1-Ag4-1细胞株培养的无菌技术要点
阅读：404 发布时间：2021/6/23 16:40:21
小鼠骨髓瘤细胞；P3/NSI/1-Ag4-1细胞株培养的具体无菌技术要点：
1. 实验开始前，无菌室和无菌操作台需要紫外光照射30到60分钟完全灭菌，用70%ethanol擦拭无菌操作台面，并且打开无菌操作台风扇运行10分钟之后，才可以进行实验操作。每次操作只能处理一株细胞株，即使培养基完全相同也不可共用培养基，以避免细胞间污染或失误混淆。实验完成后，请将实验物品拿出工作台，用70%ethanol再次擦拭无菌操作台面。操作间隔应该让无菌操作台运转10分钟到15分钟后，才能进行下一个细胞株的操作。
2. 无菌操作工作的区域应保持清洁和宽敞，必要物品（试管架、吸管、吸取器或吸管盒等）可以暂时放置，其它实验用品使用完毕后应移出，有利于空气流通。实验用品需70%ethanol擦拭后方可带入无菌操作台内。实验操作过程应在台面的中央无菌区域内完成，请勿在边缘非无菌区域进行操作。
3. 小心取用无菌实验物品，避免细菌污染。请勿触碰吸管尖头部和容器瓶口处，也不要在打开的容器正上方进行操作。容器打开后，请用手夹住瓶盖并轻握瓶身，倾斜大约45°角取用，尽量不要将瓶盖口朝上放置于桌面。
4. 工作人员应当首先注意自身安全，必须穿戴齐实验衣和实验手套后才能进行实验。对于病毒感染或是来自人类的细胞株应当特别小心操作，并选择适当等级的无菌操作台进行（至少是Class II）。操作过程中，应避免引起aerosol的产生，小心有毒性药品，例如DMSO和TPA等，并避免针头的伤害等等。
5. 定期检测下列项目：
5.1. CO2钢瓶的CO2压力
5.2. CO2培养箱的CO2浓度、温度、和水盘是否有污染（水盘的水需用无菌水，每周定时更换）。
5.3. 无菌操作台内的airflow压力，定期更换紫外线灯管和HEPA过滤膜，预滤网（300小时/预滤网，3000小时/HEPA）。
6. 水槽内可添加消毒剂（Zephrin 1:750），需定期更换水槽中的水。
人小肠粘膜上皮细胞完全培养基
人结肠粘膜上皮细胞完全培养基
人直肠粘膜上皮细胞完全培养基
人肝内胆管上皮细胞完全培养基
人肝实质细胞完全培养基
人肝动脉内皮细胞完全培养基
人肝动脉平滑肌细胞完全培养基
人肝星形细胞完全培养基
人肝窦内皮细胞完全培养基
人胃粘膜上皮细胞完全培养基
人直肠平滑肌细胞完全培养基
人胎盘羊膜细胞完全培养基
人胎盘滋养层细胞完全培养基
人胎盘绒毛膜细胞完全培养基
人子宫平滑肌细胞完全培养基
人子宫成纤维细胞完全培养基
人卵巢上皮细胞完全培养基
人卵巢成纤维细胞完全培养基
人卵巢微血管内皮细胞完全培养基
人子宫内膜上皮细胞完全培养基
人子宫颈上皮细胞完全培养基
人睾丸支持细胞完全培养基
人肾小球内皮细胞完全培养基
人肾管状上皮细胞完全培养基
人肾皮层上皮细胞完全培养基
人肾上皮细胞完全培养基
人输尿管上皮细胞完全培养基
人肾实质细胞完全培养基
原创作者：上海莼试生物技术有限公司
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![人胚肾细胞；293 [HEK-293]](http://img5.zhihuilv.com/223/Products/Small/20190314/201903141023106619.jpg)
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