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抗人BCS1-like小鼠杂交瘤细胞；1C3C12A2胞培养步骤
阅读：336 发布时间：2022/5/26 16:02:39
抗人BCS1-like小鼠杂交瘤细胞；1C3C12A2胞培养步骤：1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
2、对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心8-10分钟，弃上清液，补加1-2ml培养液后吹匀，将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法三：可选择半数换液方式，弃半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
1）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。弃培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，进行离心收集，1000RPM条件下离心8-10分钟，去除上清，按冻存数量加入到冻存液中。Skirrow琼脂
改良CCD琼脂基础
Bolton肉汤基础
哥伦比亚琼脂培养基
Skirrow琼脂配套试剂
改良CCD琼脂配套试剂
Bolton肉汤配套试剂
水解酪蛋白胨（MH）琼脂
布氏肉汤
Skirrow琼脂
改良CCD琼脂基础
Bolton肉汤基础
哥伦比亚琼脂培养基
高氏合成1号琼脂培养基
血平板 (成品培养基)
哥伦比亚血平板(成品培养基)
改良克氏双糖培养基
硝酸盐蛋白胨水培养基
半固体琼脂
3%氯化钠三糖铁琼脂
血琼脂培养基基础
苯丙氨酸培养基
原创作者：上海莼试生物技术有限公司
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![人胚肾细胞；293 [HEK-293]](http://img5.zhihuilv.com/223/Products/Small/20190314/201903141023106619.jpg)
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