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小鼠少突胶质细胞髓鞘糖蛋白抗体(OMgp-Ab)检测ELISA试剂盒使用方法

阅读:344     发布时间:2022/8/4 14:46:32

 小鼠少突胶质细胞髓鞘糖蛋白抗体(OMgp-Ab)检测ELISA试剂盒使用方法:
测定法的灵敏度来自作为报告的酶。众所周知,酶是一种有机催化剂,很少量的酶即可诱导大量的催化反应,产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。   24μg/ml    5号标准品    150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
12μg/ml    4号标准品    150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
6μg/ml     3号标准品    150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
3μg/ml     2号标准品    150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
1.5μg/ml   1号标准品    150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。|
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X)2ml
SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X)15ml
SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X)10ml
SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(2X)5ml
SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(6X)2ml
非变性PAGE蛋白上样缓冲液(5X)2ml
非变性非还原性蛋白上样缓冲液(5X)2ml
考马斯亮蓝快速染色液250ml
考马斯亮蓝染色试剂盒(常规法)1盒
考马斯亮蓝染色液(常规法)250ml
考马斯亮蓝染色脱色液(常规法)500ml
快速银染试剂盒25次
30% Acr-Bis (29:1)100ml
40% Acr-Bis (39:1)100ml
Ammonium persulfate (APS)10g
Coomassie brilliant blue G2505g
Coomassie brilliant blue R2505g
0.5M DTT2ml
0.5M DTT10ml
SDS80g
SDS80g
10% SDS100ml
TEMED10ml
1M Tris-HCl,pH6.8100ml
1M Tris-HCl,pH8.8100ml
1.5M Tris-HCl,pH8.8100ml
蛋白质分子量标准200微升
 

原创作者:上海莼试生物技术有限公司

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