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人清道夫受体B(SRB/CD36)elisa试剂盒操作步骤

阅读:409     发布时间:2022/9/1 11:10:55

人清道夫受体B(SRB/CD36)elisa试剂盒操作步骤:

1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟。
肌球蛋白轻链激酶(MYLK)重组蛋白
肌球蛋白重链1(MYH1)重组蛋白
肌球蛋白重链2(MYH2)重组蛋白
肌细胞生成素(MYOG)重组蛋白
肌原纤蛋白1(FBN1)重组蛋白
基质金属蛋白酶1(MMP1)重组蛋白
基质金属蛋白酶10(MMP10)重组蛋白
基质金属蛋白酶11(MMP11)重组蛋白
基质金属蛋白酶12(MMP12)重组蛋白
基质金属蛋白酶13(MMP13)重组蛋白
基质金属蛋白酶15(MMP15)重组蛋白
基质金属蛋白酶2(MMP2)重组蛋白
基质金属蛋白酶23A(MMP23A)重组蛋白
基质金属蛋白酶23B(MMP23B)重组蛋白
基质金属蛋白酶26(MMP26)重组蛋白
基质金属蛋白酶3(MMP3)重组蛋白
基质金属蛋白酶7(MMP7)重组蛋白
基质金属蛋白酶8(MMP8)重组蛋白
基质金属蛋白酶9(MMP9)重组蛋白
基质细胞衍生因子4(SDF4)重组蛋白
基质重塑关联蛋白5(MXRA5)重组蛋白
激活T-细胞核因子1(NFATC1)重组蛋白
激素敏感性脂肪酶(LIPE)重组蛋白
激肽释放酶10(KLK10)重组蛋白
激肽释放酶11(KLK11)重组蛋白
 

原创作者:上海莼试生物技术有限公司

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