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伏马毒素检测试剂盒原理及用途

阅读：506 发布时间：2020/2/13 16:47:22

伏马毒素检测试剂盒原理及用途

伏马毒素(Fumonisins)是由串珠镰刀菌产生的真菌毒素，目前已知有28种衍生物，研究表明伏马毒素可引发马的白脑软化症，猪的肺水肿综合症，此外，还可诱发人类的食道癌和肝癌、胃癌等疾病，对畜牧业和人类的健康构成危害。

伏马毒素检测试剂盒由预包被偶联抗原的酶标板、辣根酶标记物、抗体、标准品及其他配套试剂组成。检测时，加入标准品或样品溶液，样本中的伏马毒素和酶标板上预包被偶联抗原竞争抗伏马毒素抗体，加入酶标记物后，用TMB底物显色，样本吸光度值与其所含伏马毒素含量成负相关，与标准曲线比较乘以样本稀释倍数即可得出样本中伏马毒素的残留量。

联免疫试验步骤

将所需试剂从4℃冷藏环境中取出，置于室温平衡30min以上, 洗涤液冷藏时可能会有结晶需恢复到室温以充分溶解，每种液体试剂使用前均须摇匀。取出需要数量的微孔板及框架，将不用的微孔板放入自封袋，保存于2-8℃。

实验开始前，用去离子水将20×浓缩洗涤液按20倍稀释成工作洗涤液。

1 编号：将样本和标准品对应微孔按序编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。

2 加样反应：加标准品或样本50μl/孔到各自的微孔中，然后加酶标记物50μl/孔，再加入50μl/孔的抗体工作液，用盖板膜封板，轻轻振荡5秒混匀，25℃反应30分钟。

3 洗涤：小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，用工作洗涤液250μl/孔充分洗涤5次，每次间隔30秒，用吸水纸拍干（拍干后未被清除的气泡可用干净的枪头刺破）。

4 显色：每孔加入底物液A 50μl，再加底物液B 50μl，轻轻振荡5秒混匀，25℃避光显色15分钟。

5 终止：每孔加入终止液50μl，轻轻振荡混匀，终止反应。

6 测吸光值：用酶标仪于450nm处测定每孔吸光度值（建议用双波长450/630nm）。测定应在终止反应后10分钟内完成。

原创作者：上海莼试生物技术有限公司

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