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细胞培养基方案详解

阅读：597 发布时间：2020/7/8 14:20:41

在保持细胞完整性的同时快速从基质中移除各种细胞系的一般程序。这个过程并不意味着对所有细胞系都适用。个别系统的最佳条件和浓度应根据经验确定。传代培养时应定期监测细胞活力。细胞活力应大于90%。

取出并丢弃废细胞培养基。

用不含钙和镁的平衡盐溶液清洗细胞，或用EDTA清洗。将洗涤液加入烧瓶与试管相对的一侧。摇动烧瓶1至2分钟，冲洗细胞板，并丢弃洗涤液。

将2-3 ml/25 cm2的所选解离溶液添加到与细胞相对的烧瓶侧。确保解离溶液覆盖在细胞膜上。在37°C下培养烧瓶。轻轻摇动烧瓶。一般情况下，细胞在5-15分钟内被解离，实际需要的时间会因细胞系的不同而有所不同。仔细监控过程以避免细胞损伤。除了轻轻摇动外，还可以敲打瓶状细胞系，这些细胞系的特征是很难从基质中移除，以加速去除。

当电池完全分离后，将烧瓶竖直放置，使电池排至烧瓶底部。向烧瓶中加入完整的培养基。用移液管在单层膜表面反复分散细胞。计数细胞并传代培养。

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