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ZNF426抗体分子标记技术

阅读:252     发布时间:2023/8/14 16:47:14

 ZNF426抗体分子标记技术:
(一)原理
当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为残基,残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
(二)准备
1.试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体;0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5;无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5);胺T反应终止缓冲液;

(三)操作要点
1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行;
2.如果氧化反应损伤蛋白质,可将抗体与异硫酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m,并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年;
4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天);
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低;
6.碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。
Arginase 1精氨酸酶1抗体
AKD1腺苷酸激酶结构域蛋白1抗体
ABCA7三磷酸腺苷结合盒转运蛋白7抗体
phospho-Na+/K+-ATPase Alpha1(Ser 943)磷酸化钠钾ATP酶α1多肽抗体
ATP1A1Na+/K+-ATPase α1 钠钾ATP酶α1抗体
BAF53b肌动蛋白样蛋白6B抗体
Ataxin 7脊髓小脑共济失调蛋白7抗体
phospho-c-Abl (Tyr70)磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体
APBA1β淀粉样前体蛋白结合蛋白1抗体(X11α)
Apolipoprotein E载脂蛋白E抗体
AFP甲胎蛋白AFP抗体
AE2阴离子交换蛋白2抗体
Aconitase 1铁调节蛋白1抗体
ATAD3A三磷酸腺苷酶家族蛋白3A抗体
APOJ载脂蛋白J抗体
APOH载脂蛋白H抗体
ART4二磷酸腺苷核糖基转移酶4抗体
AKIRIN2AKIRIN2蛋白抗体
ARL8BADP核糖基化样因子8B抗体
ATAD2三磷酸腺苷酶家族蛋白2抗体
AKIRIN1AKIRIN1蛋白抗体
 
 
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