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pHyVec4

  • 产品货号:CS-ZJ1020
  • 产品价格:电议
  • 产品产地:国产、进口
  • 包装类型:
  • 采购热度:5558
  • 库存:
  • CAS号:
  • 方法:
  • 含量:
  • 品牌名称:莼试
  • 分子式:
  • 分子量:

简介内容:pHyVec4质粒是使用广泛的基因操作工具,可以进行编码基因、microRNA、lncRNA的功能研究、启动子活性、转录因子及3’UTR调控研究等。

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标签:pHyVec4 

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 质粒名称:pHyVec4
质粒规格:2ug
 
实验步骤:
1)质粒提取
1.10,0001min离心收集1.5-5ml菌液沉淀于1.5ml离心管中
2.加入100溶液1,振荡至彻底悬浮
3.加入200溶液2,立即轻柔颠側离心管6次,使菌体充分裂解,随后将离心管冰上放置
3分钟
4.加入150山溶液3,立即温和颠倒离心管数次,冰上放置3分钟,10,00g离心10mins
5.将步骤4的上清转移至新的离心管(尽量去除杂质),加入等体积的苯酚/氖仿/异成醇混
合均匀10,000离心5min
将步骤5的上清转移至新的离心管,加入2倍体积的无水乙醇,室温放置5-1omin,沉
降DNA
7.10000g离心10分钟,弃乙醇,保留沉淀,加入1ml706的乙醇洗涤沉淀,10,000离
心5分钟
8.倒掉乙醇溶液,用吸水纸吸净管壁上的水珠,室温蒸发痕量乙醇
9.加入适量含 Rnase的TE或灭菌双蒸水溶解质粒DNA
2)质粒鉴定琼脂糖礙胶电泳
灌胶:胶中加入芡光染料〈 SYBR Green)
加样:质粒+上样緩冲液→混匀
电泳
结果观察:UV灯下
 
pHyVec4实验分析:
裂解细胞中除含有质粒DNA外,还含有基因组DNA、各种RNA、蛋白质和脂类等物质,因
用碱裂解法除去杂质
1、防止DNA裂解: Solution1
1)、所含糖增加溶洨黏度,維持渗透压,防止DNA受机械剪切作用降解
2)、所含EDTA抑制酶活性
2、溶解与变性: Solution2
1)强碱使质粒DNA和染色体DNA变性
100580-200501马来酸曲美布汀含量测定100mg
100581-200501西吡氯铵含量测定100mg
100583-200401吗氯贝胺UV法含量测定50mg
100584-200401奥沙利铂HPLC法含量测定100mg
100585- 201003 尼群地平含量测定100mg
100586-200401盐酸尼卡地平含量测定100mg
100587-200901双硫化物检查用50mg
100588-200501匹多莫德含量测定100mg
100589-200501醋甲唑胺含量测定100mg
100590-200902阿托伐他汀钙含量测定100mg
100591-200501己酮可可碱含量测定100mg
100592-200401氯波必利含量测定50mg
100593-200401异丁司特含量测定50mg
100594-200801醋氨己酸锌供检查用100mg
100595-200501异环磷酰胺含量测定100mg
 

原创作者:上海莼试生物技术有限公司

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