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产品属性:
产品名称 | 英文名称 | 规格 | 货号 |
动物组织/细胞线粒体DNA提取试剂盒 | Animal tissue/cell Mitochondrial DNA Extraction Kit | 50T|100T | CS-01F99091 |
介绍
本试剂盒用于从动物细胞或组织中分离出完整而纯化的线粒体。适合于动物软组织(肝或脑组织)和硬组织(肌肉)以及培养细胞线粒体DNA的提取制备。不适合植物及其他标本的提取。
线粒体DNA提取的关键是尽可能的去掉核DNA。本试剂盒利用差速离心到比较纯净的线粒体,再利用DNA酶消化裂解缓冲系统等多步骤去掉核DNA,最后得到纯净的线粒体DNA。可用于PCR等对纯度要求较高的实验。 保存条件:2~8℃可保存一年。使用前,在DNA酶I中加入600μl(50T)或者1100μl(100T)的DNA酶反应液,分装后-20度保存。线粒体裂解液使用前常温保存,如有沉淀可37度水浴溶解,不影响使用。 操作步骤: 准备工作:在DNA酶I中加入600μl(50T)或者1100μl(100T)的DNA酶反应液,适当分装后-20度保存。线粒体裂解液保存于常温,如有沉淀37℃水浴溶解,离心机温度下降到4℃(2~8℃),如无低温离心机,也可以常温离心,并将离心时间为10min的改为5min,但最后所得DNA品质及产量可能会有一定影响。 注意事项: 1.为保证获得完整及尽可能多的线粒体,匀浆条件要示:第一是全程低温操作。第二是快速。第三,如用条件可将匀浆后的碎片在显微镜下观察。与组织块相比,培养细胞特别是贴壁培养细胞在用玻璃匀浆器匀浆时较难破壁,因而要选用小容量玻璃匀浆器、间隙严密的研杵上下研磨培养细胞。 2.线粒体DNA本身含量很低,如果电泳检测不到,可加大上样量,用更少量的TE溶解沉淀,或者直接进入PCR检测。 |
原创作者:上海莼试生物技术有限公司
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