M-1小鼠肾集合管
细胞的培养条件可分为基础培养环境、培养基体系、传代/换液操作、冻存复苏四大核心模块，不同厂商的推荐方案略有差异，可根据实验需求选择适配体系：
🌡️ 基础培养环境
温度与气相：恒定37℃培养，气相条件为95%空气+5%CO₂，培养箱相对湿度维持在70%-80%。
生长特性：贴壁上皮样
细胞，贴壁速度偏慢，传代后建议静置培养2天不要频繁移动。
🧪 完全培养基体系
目前主流有两种成熟可选方案：
高糖DMEM体系：高糖DMEM基础培养基+10%胎牛血清，可添加1%双抗，适配常规快速扩增培养。
DMEM/F12优化体系：DMEM/F12基础培养基+5%胎牛血清，额外添加196.25ng/ml地塞米松，更贴合
细胞原生集合管功能表型，适合功能实验。
🔄 传代与换液操作
传代时机：
细胞汇合度达到80%-90%时即可传代。
消化操作：用不含钙镁离子的PBS润洗1-2次，加入0.25%胰蛋白酶-EDTA，37℃消化1-8分钟，镜下观察细胞间隙变大、细胞变圆时，立即加入完全培养基终止消化。
传代比例：首次传代推荐1:2分瓶，常规维持培养可按1:3~1:4比例分瓶。
换液频率：每2-3天换液一次，每周换液2-3次即可。
❄️ 冻存与复苏条件
冻存液配方：可选无血清冻存液，或完全培养基+10%DMSO的现配体系，优化体系可在基础配方中补充地塞米松。
冻存程序：程序降温后直接放入-80℃冰箱过夜，24小时后转入液氮长期保存。
复苏操作：37℃水浴快速解冻后离心去除冻存液，接种至T25培养瓶，次日更换新鲜完全培养基即可。
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021-59541103 021-60443211
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