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‌ 450nm吸光度法测定ACA/CENP浓度的常规全流程耗时约2.5~3小时‌，其中核心反应与读数环节约1.5小时，加上前期样本与试剂准备的时间，可完整完成从试剂盒试剂样本处理到浓度输出的全部操作。

各环节具体耗时明细

‌前期准备阶段‌

试剂盒试剂从2~8℃取出后，室温平衡30分钟，同时完成浓缩洗涤液稀释、样本复融与预处理。

血清样本需3000转离心10分钟分离上清，血浆样本离心耗时约30分钟。

‌核心反应操作阶段‌

加样完成后，37℃湿盒第一次温育‌30分钟‌，随后洗板5次，总耗时约10分钟。

加入HRP标记二抗后，重复37℃温育‌30分钟‌，再次完成5次洗板操作，耗时约10分钟。

加入TMB底物液，室温避光显色‌10~15分钟‌。

‌读数与结果计算阶段‌

加入终止液混匀后，需在10分钟内用酶标仪在450nm波长下完成全板吸光度扫描，读数耗时仅2~3分钟。

后续绘制标准曲线、代入吸光度换算ACA/CENP浓度，约5~10分钟即可完成。

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