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产品名称	检测方法	规格	货号
蛋白质羰基含量测定试剂盒	分光光度法	50管/24样	CS-01Ｓ63515

注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义：

蛋白质羰基是多种氨基酸在蛋白质的氧化修饰过程中的早期标志，其含量高低表明蛋白质氧化损伤程度的大小，是衡量蛋白质氧化损伤的主要指标。

商品介绍：

测定原理

羰基与2,4-二硝基苯肼反应生成红色2,4-二硝基苯腙，在370nm处有特征吸收峰。

自备实验用品及仪器

天平、恒温水浴锅、低温离心机、漩涡震荡仪、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿和蒸馏水，无水乙醇，乙酸乙酯。

试剂组成和配制

提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存。

试剂一：粉剂0.1g×5支，4℃避光保存。（使用前根据样品数，每支加1mL水溶解，每支为10个样品用量）

试剂二：液体20mL×1瓶，4℃避光保存。

试剂三：液体20mL×1瓶，4℃保存。

试剂四：液体25mL×1瓶，4℃保存。

试剂五：根据测定样品量，将乙酸乙酯和无水乙醇等体积混合。

试剂六：液体100mL×1瓶，4℃保存。

样品处理

1.组织样品：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆，于4℃，4000g离心10min，取上清，加入0.1mL试剂一，室温放置10min，4℃，10000g离心10min，取上清待测。

2.细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后10000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。

3.血清等液体样本：直接测定。

测定步骤和操作表

计算公式

1.按照样本蛋白浓度计算

蛋白质羰基含量（μmol/mg prot）= [ΔA370×V反总÷（ε×d）]÷(V样×Cpr) =0.227×ΔA370÷Cpr

2.按照样本重量计算

蛋白质羰基含量（μmol/g 鲜重）= [ΔA370×V反总÷（ε×d）]÷(W ×V样÷V样总) =0.227×ΔA370÷W

3. 按照细胞数量计算

蛋白质羰基含量（μmol/104cell）= [ΔA370×V反总÷（ε×d）]÷(细胞数量 ×V样÷V样总) =0.227×ΔA370÷细胞数量

4.按照液体体积计算

蛋白质羰基含量（μmol/mL）= [ΔA370×V反总÷（ε×d）]÷V样=0.227×ΔA370

V反总：反应体系总体积，1mL；ε：羰基微摩尔消光系数，22×10-3 L/μmol/cm；d：比色皿光径，1cm；V样：加入样本体积，0.2 mL；V样总：加入提取液体积，1 mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL，W：样本质量，g

注意事项

1. 试剂一使用之前根据要测定的样品数现配，配置好后4℃保存，若变为黑色，则不能使用。

2. 试剂二见光易分解，反应需严格避光。

注意：

1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原创作者：上海莼试生物技术有限公司

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1、报价含普票、运费。

2、常用试剂备货充足，除对温度要求极其严格的产品当天可发货。

3、进口原装产品要3-6周的货期，详细情况请咨询客服。

4、订货时间为工作日每周一至周五16:00之前。

5、如需代为检测，标本对环境温度高，可联系客服安排专人取样（限省内客户）。

6、代测免收代测费，一周出结果。

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蛋白质羰基含量测定试剂盒分光光度法50管/24样