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磷脂酶C(?Phospholipases?C,PLC?)试剂盒微量法100T/96S

  • 产品货号:CS-01S63839
  • 产品价格:电议
  • 产品产地:进口、国产
  • 包装类型:100T/96S
  • 采购热度:604
  • 库存:100
  • CAS号:
  • 方法:微量法
  • 含量:
  • 品牌名称:莼试
  • 分子式:
  • 分子量:

简介内容:磷脂酶C(?Phospholipases?C,PLC?)试剂盒质量可靠、价格优惠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点。

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标签:磷脂酶C(?Phospholipases?C PLC?)试剂盒 

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产品名称

检测方法

规格

货号

磷脂酶C(?Phospholipases?C,PLC?)试剂盒

微量法

100T/96S

CS-0163839

   注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

磷脂酶CEC3.1.4.3)是一种水解甘油磷酸酯C3位点甘油磷酸酯键的脂类水解酶,广泛存在于微生物及动植物的组织和细胞中,在细胞代谢、细胞传递、生长发育等方面具有重要作用。

商品介绍:

测定原理

磷脂酶C催化水解NPPC产生对硝基苯酚,在410nm处有特征吸收峰。

自备实验用品及仪器

天平、研钵、超速冷冻离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、恒温水浴锅。

试剂组成和配制

提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。

试剂一:液体102mL×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体10mL×1瓶,4℃避光保存。

试剂三:液体8mL×1瓶,4℃保存。

酶液提取

1.组织:按照质量(g):提取液体积(mL)15~10的比例(建议称取约0.1g,加入1mL提取液)加入提取液,冰浴匀浆后于4℃,10000g离心5min,取全部上清于4℃、100000g离心30min,弃上清,取沉淀溶于1mL试剂一。

2.细胞:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~10001的比例(建议500万细胞加入1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后于4℃,10000g离心5min,取全部上清于4℃、100000g离心30min,弃上清,取沉淀溶于1mL试剂一。

3.血清:直接测定。

测定操作

酶活计算公式

a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准曲线:y = 0.0191x - 0.0103R2 = 0.9991

1.按照蛋白浓度计算

酶活性定义:每毫克蛋白每分钟水解NPPC产生1nmol对硝基苯酚所需的酶量为一个酶活力单位。

PLC活性(nmol/min/mg prot=(△A+0.0103)÷ 0.0191×V反总÷(V样×Cpr) ÷T

= 17.45×(△A+0.0103)÷ Cpr

2.按照样本质量计算

酶活性定义:每克组织每分钟水解NPPC产生1nmol对硝基苯酚所需的酶量为一个酶活力单位。

PLC活性(nmol/min/g 鲜重)=(△A+0.0103)÷ 0.0191×V反总÷(V样÷V样总×W) ÷T

= 17.45×(△A+0.0103)÷ W

3.按照细胞数量计算

酶活性定义:每104个细胞每分钟水解NPPC产生1nmol对硝基苯酚所需的酶量为一个酶活力单位。

PLC活性(nmol/min/104 cell=(△A+0.0103)÷ 0.0191×V反总÷(V样÷V样总×细胞数量) ÷T

= 17.45×(△A+0.0103)÷ 细胞数量

4.按照液体体积计算

酶活性定义:每毫升血清每分钟水解NPPC产生1nmol对硝基苯酚所需的酶量为一个酶活力单位。

PLC活性(nmol/min/mL= (△A+0.0103)÷ 0.0191×V反总÷V样÷T

= 17.45×(△A+0.0103

V反总:反应总体积,0.2mLV样:加入样本体积,0.02mLV样总:加入提取液体积,1mLCpr:样本蛋白浓度,mg/mLW:样本质量,gT:反应时间,30min

b.96孔板测定的计算公式如下

标准曲线:y = 0.0095x - 0.0103R2 = 0.9991

1.按照蛋白浓度计算

酶活性定义:每毫克蛋白每分钟水解NPPC产生1nmol对硝基苯酚所需的酶量为一个酶活力单位。

PLC活性(nmol/min/mg prot=(△A+0.0103)÷ 0.0095×V反总÷(V样×Cpr) ÷T

= 35.09×(△A+0.0103)÷ Cpr

2.按照样本质量计算

酶活性定义:每克组织每分钟水解NPPC产生1nmol对硝基苯酚所需的酶量为一个酶活力单位。

PLC活性(nmol/min/g 鲜重)=(△A+0.0103)÷ 0.0095×V反总÷(V样÷V样总×W) ÷T

= 35.09×(△A+0.0103)÷ W

3.按照细胞数量计算

酶活性定义:每104个细胞每分钟水解NPPC产生1nmol对硝基苯酚所需的酶量为一个酶活力单位。

PLC活性(nmol/min/104 cell=(△A+0.0103)÷ 0.0095×V反总÷(V样÷V样总×细胞数量) ÷T

=35.09×(△A+0.0103)÷ 细胞数量

4.按照液体体积计算

酶活性定义:每毫升血清每分钟水解NPPC产生1nmol对硝基苯酚所需的酶量为一个酶活力单位。

PLC活性(nmol/min/mL= (△A+0.0103)÷ 0.0095×V反总÷V样÷T

= 35.09×(△A+0.0103

V反总:反应总体积,0.2mLV样:加入样本体积,0.02mLV样总:加入提取液体积,1mLCpr:样本蛋白浓度,mg/mLW:样本质量,gT:反应时间,30min

注意:

1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原创作者:上海莼试生物技术有限公司

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1、报价含普票、运费。

2、常用试剂备货充足,除对温度要求极其严格的产品当天可发货。

  

3、进口原装产品要3-6周的货期,详细情况请咨询客服。

  

4、订货时间为工作日每周一至周五16:00之前。

  

5、如需代为检测,标本对环境温度高,可联系客服安排专人取样(限省内客户)。

  

6、代测免收代测费,一周出结果。

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