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产品名称 | 英文名称 | 规格 | 货号 |
耐热逆转录酶II | Reverse Transcriptase II | 2000U | CS-01F97207 |
Reverse Transcriptase(代耐热逆转录酶)是Reverse Transcriptase(代耐热逆转录)的升级产品,是在M-MLV (RNase H-) Reverse Transcriptase基础上通过体外分子进化技术获得的全新耐热逆转录酶。与上一代相比,进一步大幅提高了热稳定性,50℃下半衰期过240min,并长时间耐受55℃高温且保持稳定,非常适合具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录。此外,增加了多个突变位点,进一步增了模板亲和力和行进性,大幅提升全长cDNA的合成能力,可获得长达20 kb的cDNA。另外,对于常见的逆转录抑制物具有更高的耐受度,非常适合于植物组织RNA的逆转录反应。
活性定义:以Poly(rA) Oligo(dT)为模板/引物,在37℃,10min内,掺入1 nmol的dTTP为酸不性溶物质所需要酶量定义为1个活性单位(U)。
质量控制 核酸外切酶残留检测:200 U本品和0.6 μg λ-Hind Ⅲ在37 oC下孵育1h,DNA的电泳谱带不发生变化。 核酸内切酶残留检测:200 U本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在37 oC下孵育1h,DNA的电泳谱带不发生变化。 RNase残留检测:200 U本品和1 μg小鼠总RNA在37 oC下孵育1h,RNA电泳谱带不发生变化。 功能检测1:逆转录体系中加入200 U本品,以100 pg Hela cell total RNA为模板,Oligo(dT)23为引物,50 oC反应30min。取10% cDNA产物进行PCR扩增β-actin基因。琼脂糖凝胶电泳,EB染色,可见有单一的550 bp条带。 功能检测2:逆转录体系中加入200 U本品,以500 ng Hela cell total RNA为模板,Oligo(dT)23为引物,55 oC反应45min。取10% cDNA产物进行PCR扩增Polε基因。琼脂糖凝胶电泳,EB染色,可见有单一的4.8 kb (GC-rich)条带。 |
原创作者:上海莼试生物技术有限公司
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