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产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
图 | 分光光度法 | 50管/24样 | CS-01S63529 |
铜蓝蛋白是血浆的含铜蛋白,有运输铜的功能,同时具有氧化酶的活性,是细胞外液重要的抗氧化剂。
测定原理
铜蓝蛋白催化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺生成蓝色产物,在645nm处有特征吸收峰,依此可得铜蓝蛋白活性。
自备实验用品及仪器
天平、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿和蒸馏水。
试剂组成和配制
试剂一:液体15mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:液体10mL×1瓶,4℃保存。
试剂三:液体20mL×1瓶,4℃避光保存。(使用前37℃预热)
测定操作表
1、血清(浆)等液体样本:直接检测。
2、动植物组织样本:称取约0.1g组织,加入1mL蒸馏水,进行冰浴匀浆。10000g ,4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
计算公式
1、按体积计算
单位定义:37℃条件下,每分钟每毫升样品与底物作用吸光值升高0.01为一个酶活单位。
Cp活力(U/mL)=×V反总÷V样÷T=33.33×OD645
2、按鲜重计算
单位定义:37℃条件下,每分钟每克样品与底物作用吸光值升高0.01为一个酶活单位。
Cp活力(U/g鲜重)=×V反总÷(W×V样÷V样总)÷T=33.33×OD645÷W
3、按蛋白浓度计算
单位定义:37℃条件下,每分钟每毫克蛋白样品与底物作用吸光值升高0.01为一个酶活单位。
Cp活力(U/mg prot)=×V反总÷(Cpr×V样)÷T=33.33×OD645÷Cpr
V样:0.1 mL;V反总:1 mL;T:反应时间,30min;V样总:加入提取液体积,1mL; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g
注意事项
试剂二和试剂三有一定的毒性和刺激性,请操作时做好防护措施。
原创作者:上海莼试生物技术有限公司
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