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产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
土壤脂肪酶(Solid-Lipase,S-LPS)活性试剂盒 | 分光光度法 | 50管/48样 | CS-01S63492 |
LPS又称甘油酯水解酶,催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油(或者甘油二酯和单酯)。LPS广泛的存在于各种生物中。血清中LPS的异常增高常见于胰腺炎和胰腺癌。
测定原理:
LPS催化油酯水解成脂肪酸,利用铜皂法测定脂肪酸生成速率,即可计算LPS活性。
自备仪器和用品:
研钵、台式离心机、震荡混匀器、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、甲苯100mL、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:液体90mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:液体14mL×1瓶,4℃保存。每次使用前用震荡混匀器剧烈震荡20min。
试剂三:甲苯100mL×1瓶,4℃保存(自备)。
试剂四:液体20mL×1瓶,4℃保存。
标准品:液体10μL×1瓶,10 μmol/mL的标准溶液,4℃保存。临用前加入3.168 mL甲苯,充分溶解。
样本处理
建议称取约0.1g土样,加入1mL试剂一进行冰浴匀浆,再用回旋式振荡器振荡提取15min,4℃,4000g离心10min,取上清待测。
S-LPS测定操作:
1.分光光度计预热30 min以上,调节波长到710 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂一和试剂二置于37℃水浴预热30min以上。
3.在5mL EP管中依次加入下列试剂
注意:空白管和标准管只需测定一次。
S-LPS活性计算公式:
活性单位定义:37℃中每克土样每分钟水解橄榄油生成1μmol脂肪酸为一个酶活单位。
S-LPS (μmol/min/g 土样) = [C标准品×(A测定管-A空白管)÷(A标准管- A空白管)]×V反总÷(W×V样÷V样总)÷T
=16×[(A测定管-A空白管)÷(A标准管- A空白管)]÷W
C标准品:10 μmol/mL;V反总:反应总体积,2mL;V样:反应中加入样本体积,0.125mL;V样总:加入提取液体积,1mL;W:样本质量,g;T:催化反应时间,10 min。
原创作者:上海莼试生物技术有限公司
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