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产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
土壤外切-β-1,4-葡聚糖酶/纤维二糖苷酶(S-C1)活性测定试剂盒 | 分光光度法 | 50管/24样 | CS-01S63501 |
C1(EC
测定原理:
采用3,5-二硝基水杨酸法测定C1催化微晶纤维素降解产生的还原糖的含量。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制:
提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;
试剂一:液体15mL×1瓶,4℃保存;
试剂二:液体60mL×1瓶,4℃保存;
样品测定的准备:
称取约0.1g新鲜土样或风干土样,加入1mL提取液,进行冰浴匀浆,室温振荡提取30min,然后10000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
测定步骤:
1、分光光度计预热30min以上,调节波长至540nm,蒸馏水调零。
2、加样表(在EP管中依次加入下列试剂):
S-C1活性计算
标准条件下测定回归方程为y = 6.4078x - 0.0673;x为标准品浓度(mg/mL),y为吸光值。
单位的定义:每g土样每分钟催化产生1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
S-C1活力(μg /min /g鲜重)=[1000×(ΔA+0.0673) ÷6.4078×V反总]÷(W× V样÷V样总) ÷T
=14.305×(ΔA+0.0673) ÷W
1000:1mg/mL=1000ug/mL;V反总:反应体系总体积,0.55mL; V样:加入样本体积,0.05 mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,120 min;W:样本质量,g。
原创作者:上海莼试生物技术有限公司
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